Zestaw ELISA przeciwciał o gruźlicy bydlęcej

Specyfikacja

 

Procedury testowe i interpretacja

 

Krok 1Procedura testowa

1.1 Przygotowanie roztworu prania

Wkoncentracja orkingowa wPłyn:Przed użyciem roztwór prania należy przywrócić do temperatury pokojowej ({20-25) i wstrząśnąć równomiernie, aby było jednolite. Następnie rozcieńczają 20 -krotność stężonego roztworu prania oczyszczoną wodą (na przykład 5 ml stężonego roztworu mycia jest dodawana do oczyszczonej wody o oczyszczonej 95 ml), dobrze wymieszaj, a rozcieńczoną ciecz mycia można przechowywać w stopniu 2-8 przez 7 dni.

1.2 Przygotowanie próbki

① Wzięto całą krew zwierząt, wirowano przy 4000 obr./min przez 10 minut i zebrano supernatant. Serum można również naturalnie koagulować bez hemolizy.

② Rozcieńcz próbkę surowicy 1: 100 (dodaj 2UL próbkę surowicy do rozcieńczalnika próbki 198ul) i dokładnie wymieszaj.

Uwaga: Nie trzeba rozcieńczać kontroli ujemnych i pozytywnych.

1.3 Preparat koniugatu enzymu

Rozcieńcz koniugat enzymu 1: 200 (dodaj 5UL koniugat enzymu (X100) do 995L próbki rozcieńczalni) i dokładnie wymieszaj.

1.4 Procedura testowa

① Wprowadź mikropłytek etykiety enzymu (zgodnie z liczbą próbek, można usunąć i użyć kilkakrotnie), dodaj 100ul rozcieńczonej surowicy do mikropłytek etykiet enzymu, ustaw o dwóch studzienkach dla próbek ujemnych i dodatnich, i dodaj 100UL dla ujemnych i kontrole pozytywne odpowiednio reakcji. Delikatnie wstrząśnij próbką w studni, używając folii uszczelniającej do pokrycia płyty i inkubuj w 37 stopnie przez 30 minut.

② Otwórz warstwę płyty uszczelniającej, strząśnij roztwór na płycie, dodaj do każdej studzienki 300 µl pracy stężenia, a następnie odrzuć ciecz do studni. Powtórz powyższe kroki 5 razy, a na koniec osuszyć na czystym chłonnym papierze.

③DD 100 µl koniugatu enzymu do każdej studzienki, pokrywa płytkę i inkubuj w 37 stopnie przez 45 minut.

④ Otwórz warstwę płyty uszczelniającej, strząśnij roztwór na płycie, dodaj do każdej studzienki 300 µl pracy stężenia, a następnie odrzuć ciecz do studni. Powtórz powyższe kroki 5 razy, a na koniec osuszyć na czystym chłonnym papierze.

⑤ Podaj 100 µl roztworu substratu do każdej studzienki, przykryj płytkę i inkubuj przez 10 minut na 37 stopni od światła.

⑥ Podaj 50 µl roztworu do każdej studzienki i określ wynik w ciągu 5 minut.

 

Krok 2 Interpretacja wyników

 

Wartość OD450 każdej studzienki odczytano na czytniku mikropłytek 96-.

2.1 Walidacja

Średnia wartość kontroli ujemnej OD450 nm wynosiła<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Metoda obliczania

Dla każdej próbki oblicz S/P w następujący sposób przy użyciu skorygowanej próbki i wartości kontrolnych:

2.3 Interpretacja wyników

Kiedy s/p<0.25, it is judged as negative.

Gdy s/p większe lub równe 0. 30, jest oceniany jako pozytywny.

Gdy 0. 25 mniej niż lub równy S/P<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

Popularne Tagi: Zestaw ELISA, ELISA, kit o gruźlicy bydlęcy, Chińskie Dostawcy Zestaw ELISA, producenci, producenci, fabryka