Klasyczny zestaw przeciwciał ELISA wirusowy wirus

Specyfikacja

 

 

Procedury testowe i interpretacja

 

Krok 1 Procedura testowa

1.1 Przygotowanie roztworu prania

Wkoncentracja orkingowa wPłyn:Przed użyciem roztwór prania należy przywrócić do temperatury pokojowej ({20-25) i wstrząśnąć równomiernie, aby uczynić go jednolitym. Następnie rozcieńczają 20 -krotność stężonego roztworu prania oczyszczoną wodą (na przykład 5 ml stężonego roztworu mycia jest dodawana do oczyszczonej wody o oczyszczonej 95 ml), dobrze wymieszaj, a rozcieńczoną ciecz mycia można przechowywać w stopniu 2-8 przez 7 dni.

1.2 Przygotowanie próbki

① Wzięto całą krew zwierząt, wirowano przy 4000 obr./min przez 10 minut i zebrano supernatant. Serum można również naturalnie koagulować bez hemolizy.

② Rozcieńcz surowicę, która ma być testowana 10 razy w płytce rozcieńczania surowicy (na przykład: Dodaj 15UL surowicy do przetestowania do rozcieńczenia próbki 135UL).

Uwaga: Nie trzeba rozcieńczać kontroli ujemnych i pozytywnych.

1.3 Procedura testowa

① Wprowadź mikropłytek etykiety enzymu (zgodnie z liczbą próbek, można usunąć i użyć kilkakrotnie), dodaj 100ul rozcieńczonej surowicy do mikropłytek etykiet enzymu, ustaw o dwóch studzienkach do kontroli negatywnej i kontroli pozytywnej, a dodaj 100UL do odpowiednio reakcja. Delikatnie wstrząśnij próbką w studni, używając folii uszczelniającej do pokrycia płyty, i inkubuj w 37 stopnie przez 30 minut.

② Otwórz warstwę płyty uszczelniającej, strząśnij roztwór na płycie, dodaj do każdej studzienki 300 µl pracy stężenia, a następnie odrzuć ciecz do studni. Powtórz powyższe kroki 5 razy, a na koniec osuszyć na czystym chłonnym papierze.

③DD 100 µl koniugatu enzymu do każdej studzienki, pokrywa płytkę i inkubuj w 37 stopnie przez 30 minut.

Otwórz warstwę płyty uszczelniającej, dobrze shakuj roztwór w płycie, dodaj do każdej studni 300 µl roboczego stężenia, a następnie odrzuć ciecz w studni. Powtórz powyższe kroki 5 razy, a na koniec osuszyć na czystym chłonnym papierze.

⑤ Podaj 100 µl roztworu substratu do każdej studzienki, przykryj płytkę i inkubuj przez 10 minut na 37 stopni od światła.

⑥ Podaj 50 µl roztworu do każdej studzienki i określ wynik w ciągu 5 minut.

 

Krok 2 Interpretacja wyników

Wartość OD450 każdej studzienki odczytano na czytniku mikropłytek 96-.

2.1 Walidacja

Średnia wartość OD45 0 NM kontroli negatywnej wynosiła <0. 2, a średnia wartość kontroli pozytywnej OD450 nm była większa lub równa 0,7, wyniki eksperymentalne były prawidłowe. W przeciwnym razie test należy powtórzyć.

2.2 Metoda obliczania

Dla każdej próbki oblicz S/ P w następujący sposób przy użyciu skorygowanej próbki i wartości kontrolnych:

2.3 Interpretacja wyników

Gdy s/p <0. 2, jest oceniany jako negatywny.

Gdy s/p> 0. 3, jest oceniany jako pozytywny.

Gdy {{0}}. 2 mniejsze lub równe S/P mniejsze lub równe 0,3, jest oceniane jako podejrzane i sugeruje powtórzenie próbkowania i przetestować tydzień później.

 

Popularne Tagi: Klasyczny Zestaw przeciwciał ELISA Virus Virus Virus, China Classic Swine Fever Virus Kit, dostawcy ELISA, producenci, fabryka